СЗМБ
Предтрансплантационная диагностика
Диагностика донора и реципиента перед органной трансплантацией заключается в иммунологическом обследовании пациентов для предупреждения отторжения трансплантата. Реакция отторжения — определяется иммунным ответом реципиента на чужеродные антигены. Ключевыми антигенами, которые стимулируют отторжение аллогенного трансплантата, являются молекулы закодированные главным комплексом гистосовместимости (ГКГС, англ. Major histocompatibility complex – МНС). У человека эти антигены называются HLA (от англ. human leukocyte antigens), в связи с тем, что они выявляются на лимфоцитах и других лейкоцитах периферической крови. Антигены гистосовместимости (трансплантационные антигены) экспрессируются на всех ядросодержащих клетках и тромбоцитах. У человека наибольшее их количество содержится в лимфоидной ткани (на лимфоцитах и макрофагах).
Ключевую роль в успешном исходе трансплантации играет степень биологической совместимости донора и реципиента по HLA антигенам, а так же идентификации предсуществующих антител реципиента к антигенам донора.
Система HISTO SPOT SSO производства BAG DIAGNOSTICS
— представляет собой тест для in vitro диагностики и помогает проводить гистотипирование HLA аллелей на молекулярно-генетической основе. Гистотипирование HLA позволяет получать результаты в диапазоне от низкого до среднего разрешения.
Система HISTO SPOT ® SSO основана на гибридизации амплифицированной ДНК со специфическими для последовательности олигонуклеотидами.
Автоматизированный рабочий процесс включает в себя следующие решения:
— Наборы HISTO SPOT® (гистотипирование локусов HLA — A, B, C, DRB1, DQB1);
— Наборы HISTO SPOT® HLA AB (скрининг и идентификация антител)
— MR.SPOT® Процессор;
— Программное обеспечение HISTOMATCH.
Система HISTO SPOT® HLA AB – тест для in vitro диагностики предсуществующих антител к лейкоцитарным антигенам. Программное обеспечение HISTO MATCH совместно с процессором mr. SPOT – вариант высокого уровня автоматизации вместо сложного рутинного анализа. Использование микроматрицы с рекомбинантными аллель-специфическими белками дает результаты с высоким разрешением и не требует ручных вмешательств специалиста. Прямая идентификация HLA-антител благодаря рекомбинантным одиночным антигенам для HLA класса I и HLA класса II с использованием минимального объема образца (2-10 мкл сыворотки). Пропускная способность от 1 до 96 образцов.
Процессор MR.SPOT® и Программное обеспечение HISTOMATCH
Процессор MR.SPOT ® гарантирует высокую точность и быстрые результаты при малых объемах и высокой производительности.
На приборе можно обрабатывать от 1 до 96 тестов за один запуск, до трех запусков в день. Благодаря высокой степени автоматизации и малому времени ручного труда система также идеально подходит для работы в ночную смену.
MR.SPOT ® автономно выполняет весь анализ от ампликона до результата. Полностью автоматическая промывка и пипетирование делают устройство очень простым в использовании. Для документирования процесса MR.SPOT ® автоматически записывает все результаты с помощью встроенной камеры и передает изображение в программу HISTO MATCH для удобной оценки. SQL server – база данных, хранящая все данные по исследованиям во избежание потери/удаления/сбоев при прогоне протокола.
MR.SPOT ® позволяет считывать штрих-коды для всех комплектов реагентов и измерять объемы расходных реактивов в соответствии с количеством исследуемых образцов. Коммерчески доступные системы могут быть интегрированы в рабочий процесс для выделения ДНК и настройки ПЦР.
Все системы и расходные материалы для проведения гистотипирования имеют регистрационное удостоверение. (здесь вложим кликабельные сертификаты)
Подтверждающая методика типирования:
— Гистотипирование методом SSP (sequence-specific primer) HISTO TYPE SSP – подтверждающая методика типирования для анализа малых объемов образцов. Метод основан на проведении ПЦР с последующей детекцией в форезном геле. Интерпретация результатов SSP возможна в программном обеспечении HISTO MATCH, по завершению внесения полученных результатов электрофореза, программа выдает конечный протокол в pdf формате.
Набор KIR TYPE SSP позволяет провести генотипирование 14 генов иммуноглобулиноподобных рецепторов киллеров (KIR) плюс 2 псевдогена. Это дает дополнительную информацию о возможных различиях между KIR и соответствующими лигандами HLA в контексте трансплантации.
— гистотипирование методом ПЦР в режиме реального времени HISTO TIPE Raynbow — быстрый вариант для типирования 11 локусов в одной пробирке, мультиплексная ПЦР для получения результата менее чем за 80 минут с момента запуска амплификации. Каждая из 96 лунок содержит 1 внутренний контроль амплификации и до 4 специфических реакций аллельных групп в 4 различных каналах. Это увеличивает способность к 384 HLA-специфическим реакциям. Для простой идентификации мы предлагаем программное обеспечение PlexTyper, совместимое с тремя видами амплификаторов:
— CFX (Bio-Rad)
— LightCycler® 480 II
— QuantStudio™ 6 Flex
Молекулярно-генетическая диагностика HLA-ассоциированных заболеваний
Взаимосвязь между определенными типами HLA и некоторыми заболеваниями была подтверждена для более чем 40 различных комбинаций.
Наиболее важной является взаимосвязь HLA-B27 с картиной серонегативного артрита (болезнь Бехтерева, болезнь Рейтера, реактивный артрит). Положительный результат HLA-B27 связан с чрезвычайно высоким риском заболевания (см. Таблицу 1). Чаще всего подтвержденный результат HLA-B27 диагностики вносит значительный вклад в терапию пациента в неясных случаях заболевания с подозрением на болезнь Бехтерева.
Заболевания |
Частота B27 у пациентов |
Относительный риск |
Анкилозирующий спондилоартрит (Болезнь Бехтерева) |
90.2 % |
91 |
Болезнь Рейтера |
78.8 % |
37.6 |
Постинфекционный реактивный артрит |
70.2 % |
|
Таблица 1: Частота HLA-B27 и риски.
Пациенты с целиакией не могут принимать в пищу продукты, содержащие глютен, который входит в состав пшеницы, ржи, ячменя и других зерновых. У людей с целиакией глютен вызывает аутоиммунную реакцию, которая приводит к разрушению ворсинок в тонкой кишке. У пациентов формируются антитела, которые атакуют кишечник, вызывая его поражение и патологические изменения. При этом также наблюдается изменение общего состояния организма, например усталость, дефицит питательных веществ. Начало заболевания основывается на двух компонентах: генетическая предрасположенность и некий пусковой механизм. Пусковой механизм может быть внешним (например, рост потребления пшеницы), ситуационным (тяжелый стресс), физическим (беременности, операции) или патологическим (вирусная инфекция).
По причине явной тенденции к семейному распространению целиакии (у 5-10% родственников первого уровня (родители, дети и родные братья) пациентов с диагностированной целиакией также может формироваться целиакия), для раннего начала лечения важна быстрая и надежная диагностика.
Как уже упоминалось ранее, целиакия возникает только у лиц с генетической предрасположенностью. Генетическое наследование целиакии связано с HLA-DQA1*05-DQB1*02 (HLA-DQ2) и HLA-DQA1*03-DQB1*0302 (HLA-DQ8). Эти аллели служат основой для аутоантител целиакии.
Более 90% людей, страдающих от целиакии, имеют одну из этих аллелей, DQ2 или DQ8 (вместо 25% в общей популяции).
Таким образом, молекулярно-генетическое обнаружение генотипов HLA-DQ2 или HLA-DQ8 является чрезвычайно полезным инструментом в диагностике целиакии.
В том случае, когда у пациента с нарушением работы желудочно-кишечного тракта нет маркера DQ2 или DQ8, у него можно практически полностью исключить целиакию.
Новости
Получено регистрационное удостоверение на HISTO SPOT HLA AB
Зарегистрированы наборы реагентов HISTO SPOT HLA AB для идентификации специфических антител к...
Получено регистрационное удостоверение на MR.SPOT ® 2
Зарегистрирована вторая версия процессора MR.SPOT ® 2 для еще более удобной автоматизированной...